數字PCR是一種新的絕對定量PCR,主要是對PCR反應物進行有限稀釋,隨后在不同的反應腔室里進行PCR擴增,最后根據泊松分布原理及陽性微滴的個數與比例得出靶分子的起始拷貝數或濃度的技術。
MicroDrop?數字PCR平臺是由永諾生物自主研發并已投入生產的國內微滴式數字PCR檢測系統,可廣泛應用于科研、醫療、出入境檢驗檢疫等領域。
技術特點:
l絕對定量,不依賴Ct值,無需標準曲線
l超高靈敏度,適用于稀有序列及稀有突變的檢測
l精準的定量結果和極佳的重復性
l適用復雜樣品檢測,不易受PCR抑制物影響
核心優勢:
l高靈敏度——數字PCR的靈敏度與同體積反應體系的分割份數成正比。
l分辨率——低至0.1倍基因表達差異
絕對定量——根據每個微滴所含平均拷貝數以及泊松分布進行計算,從而得出檢測樣本的絕對拷貝數。同時無需依賴標準曲線。
MicroDrop?微滴式數字PCR系統由MicroDrop-100A樣本制備儀、基因擴增儀、 MicroDrop-100B流式微滴檢測儀、以及QuantDrop分析軟件四個部分組成,整套系統均具有完全自主知識產權。

檢測原理:

MicroDrop?微滴式數字PCR系統工作流程:

MicroDrop-100系統產品特點:
一、適應性廣,靈活性高
1、理論上可覆蓋qPCR(熒光定量PCR)的所有應用
2、樣本多樣性,樣本通量可達96個樣本,支持靈活設定
3、開放式平臺,支持用戶自行開發試劑、產品。
二、靈敏度高,準確性高
1、絕對定量——無需依賴標準曲線
2、采用微滴式技術高達100,000個的微滴
3、線性范圍達到6個數量級,靈敏度高達萬分之一
三、可分析復雜混合物
1、精準度不完全依賴于擴增效率
2、雙通道熒光檢測,支持EvaGreen染料及探針法
3、支持多重數字PCR
四、操作簡單,使用方便
1、全封閉防污染設計,一鍵式自動化操作。
2、可選全中文分析軟件
儀器特點:
MicroDrop-100A樣本制備儀
1、單張芯片一次可處理8個樣本;
2、20微升體系生成100,000微滴;
3、單次微滴生成僅需2分鐘;
4、一鍵式自動化操作。
儀器參數
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樣本體積 | 20μl
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容量 | 1~8個樣本
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微滴總數
| 100,000
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反應時間
| 2分鐘/芯片
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儀器尺寸(寬x深x高)
| 300*400*145mm
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MD Detector 微滴檢測儀
1、全封閉體系,自動化流程操作;
2、FAM、VIC雙通道熒光檢測;
3、檢測靈敏度高達萬分之一;
4、通量達96個樣品。
儀器參數
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線性范圍
| 6個數量級
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通量
| 1~96個樣本
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檢測通道
| FAM 、HEX (VIC)
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儀器尺寸(寬x深x高)
| 700*500*325mm
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MicroDrop-100:QuantDrop數據分析軟件


數字PCR的應用
檢驗檢疫 食品安全
?轉基因食品檢測(國標)
?病原菌鑒定
?動物源性檢測分析
科研
?基因表達差異監測
?CRISPR-Cas9基因編輯結果驗證
?甲基化含量鑒定
?單細胞研究:測序、PCR
臨床
?腫瘤液體活檢:早篩、用藥、監測、復發
?無創產前篩查:低成本、快速
?感染性疾?。篐BV、HIV定量